Western Blot（WB）實(shí)驗(yàn)是研究蛋白質(zhì)表達(dá)和功能的關(guān)鍵技術(shù)之一。蛋白的提取是WB實(shí)驗(yàn)的第一步，然而，許多科研人員在實(shí)驗(yàn)過程中常常會(huì)遇到一個(gè)棘手的問題：蛋白質(zhì)降解。這不僅會(huì)導(dǎo)致目標(biāo)蛋白條帶模糊不清，甚至可能讓為期數(shù)天的WB實(shí)驗(yàn)徹底失敗。別擔(dān)心，AbMole蛋白酶抑制劑CocktAIl（Protease Inhibitor Cocktail，M5293）來為您保駕護(hù)航，讓您的WB實(shí)驗(yàn)輕松贏在起跑線上！AbMole提供高品質(zhì)抑制劑、細(xì)胞因子、人源單抗、靶點(diǎn)蛋白、天然產(chǎn)物、熒光染料、多肽、化合物庫、抗生素，全球大量文獻(xiàn)專利引用。   1. 為什么蛋白質(zhì)降解會(huì)成為WB實(shí)驗(yàn)的“絆腳石”？ 在細(xì)胞裂解或組織提取過程中，原本隱藏在各種細(xì)胞器中的蛋白酶可能會(huì)被激活，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)降解。這種降解不僅會(huì)破壞目標(biāo)蛋白的完整性，還會(huì)影響后續(xù)的檢測效果。例如，目標(biāo)蛋白可能因?yàn)榻到舛鵁o法被抗體特異性識(shí)別，或者在電泳過程中出現(xiàn)多條降解條帶，干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的解讀。因此，從樣本處理的第一步開始，防止蛋白質(zhì)降解就顯得至關(guān)重要。AbMole是ChemBridge中國區(qū)官方指定合作伙伴。   2. AbMole蛋白酶抑制劑Cocktail（Protease Inhibitor Cocktail，M5293）：全方位守護(hù)蛋白完整性  AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail（M5293）是一款含有多款抑制劑的復(fù)合物，它包含了多種高效、特異性的蛋白酶抑制劑，由AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Bestatin、E-64、Pepstatin-A等6種不同的蛋白酶抑制劑優(yōu)化配比配置而成，相較于傳統(tǒng)的由單一組分構(gòu)成的蛋白酶抑制劑如PMSF，能夠更加廣泛地抑制絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等多種常見蛋白酶的活性。這種全方位的保護(hù)機(jī)制，從樣本提取的那一刻起，就為您的目標(biāo)蛋白提供了堅(jiān)實(shí)的防護(hù)。另外一方面，PMSF具有一定的毒性和腐蝕性且半衰期較短。而AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail（M5293）則具有低毒和較強(qiáng)的穩(wěn)定性，可有效解決大家使用PMSF時(shí)的擔(dān)憂。   AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail（Protease Inhibitor Cocktail，M5293）除了用于WB實(shí)驗(yàn)以外，還能為免疫共沉淀 (Co-IP)、pull-down、免疫沉淀 (IP)、免疫組織化學(xué) (IHC)、免疫熒光 (IF)、酶學(xué)研究等多種實(shí)驗(yàn)中的蛋白提供保護(hù)。 圖1. AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail（M5293）可有效保護(hù)目的蛋白不受蛋白酶的降解。   3.成功案例  案例1. 研究人員利用WB實(shí)驗(yàn)、代謝組學(xué)分析等技術(shù)篩選與PDAC肝轉(zhuǎn)移有關(guān)的關(guān)鍵代謝物。實(shí)驗(yàn)中使用了來自AbMole的兩個(gè)爆款產(chǎn)品，即蛋白酶抑制劑Cocktail （M5293）和磷酸酶抑制劑Cocktail（M7528）對(duì)蛋白進(jìn)行保護(hù)，兩款抑制劑有效避免了蛋白的降解并保護(hù)蛋白的磷酸化狀態(tài)。
  圖2. 使用來自AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail（M5293）為WB實(shí)驗(yàn)提供保護(hù)   案例2. 研究人員發(fā)現(xiàn)FDFT1在肝細(xì)胞癌（HCC）中的表達(dá)與膽固醇和膽汁酸水平的變化相關(guān)，并通過HNF4A/ALDOB/AKT1軸影響HCC的進(jìn)展。在研究FDFT1的功能時(shí)，實(shí)驗(yàn)人員使用來自AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail（M5293）為動(dòng)物組織的蛋白提取提供保護(hù)。   圖3. AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail（M5293）為動(dòng)物組織WB實(shí)驗(yàn)中的蛋白提供保護(hù)。   案例3. 科研人員研究了miR-30a-5p/CLCF1軸在肝細(xì)胞癌（HCC）中的Sorafenib耐受性和有氧糖酵解中的作用。在驗(yàn)證CLCF1的敲低以及對(duì)下游信號(hào)蛋白的影響時(shí)，實(shí)驗(yàn)人員使用了AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail（Protease Inhibitor Cocktail，M5293）為蛋白提供保護(hù)。
  圖4. 由AbMole提供的蛋白酶抑制劑Cocktail（M5293）為WB實(shí)驗(yàn)提供保護(hù)，以驗(yàn)證CLCF1的敲低。   AbMole多年來持續(xù)聚焦生命科學(xué)研究和新藥研發(fā)最新動(dòng)態(tài)，為全球科研客戶提供高純度、高生物活性的各類小分子抑制劑、細(xì)胞因子、天然產(chǎn)物、抗生素和人源化單抗等試劑。
  參考文獻(xiàn)及鳴謝 [1] J. Yang, B. Ren, J. Ren, G. Yang, Y. Fang, X. Wang, F. Zhou, L. You, Y. Zhao, EPIgenetic reprogramming-induced guanidinoacetic acid synthesis promotes pancreatic cancer metastasis and transcription-activating histone modifications, Journal of experimental & clinical cancer research : CR 42(1) (2023) 155. [2] D. Cai, G.C. Zhong, X. Dai, Z. Zhao, M. Chen, J. Hu, Z. Wu, L. Cheng, S. Li, J. Gong, Targeting FDFT1 Reduces Cholesterol and Bile Acid Production and Delays Hepatocellular Carcinoma Progression Through the HNF4A/ALDOB/AKT1 Axis, Advanced Science (Weinheim, Baden-Wurttemberg, Germany) 12(12) (2025) e2411719. [3] Z. Zhang, X. Tan, J. Luo, H. Yao, Z. Si, J.S. Tong, The miR-30a-5p/CLCF1 axis regulates sorafenib resistance and aerobic glycolysis in hepatocellular carcinoma, Cell death & disease 11(10) (2020) 902.