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Ribo-seq技術(shù)原理與應(yīng)用方向_abio生物試劑品牌網(wǎng)

abiopp9個(gè)月前 (04-10)技術(shù)71
Ribo-seq技術(shù)原理 翻譯(Translation)是基因表達(dá)的關(guān)鍵步驟,是指信使RNA(mRNA)攜帶的遺傳信息被核糖體解碼并轉(zhuǎn)化為特定氨基酸序列的過程。蛋白質(zhì)翻譯的調(diào)控是高度精準(zhǔn)、多層次、動(dòng)態(tài)化的過程。

在全基因組水平上,轉(zhuǎn)錄與翻譯經(jīng)常存在顯著差異。通過轉(zhuǎn)錄組測(cè)序鑒定的上調(diào)表達(dá)基因中,只有其中20%在蛋白水平上調(diào)。

核糖體印跡測(cè)序(Ribosome profiling, Ribo-seq),能夠精細(xì)解析細(xì)胞內(nèi)的翻譯過程。Ribo-seq的技術(shù)核心是識(shí)別與核糖體結(jié)合的RNA,以及正在被翻譯的約30個(gè)核苷酸。對(duì)核糖體結(jié)合的RNA片段進(jìn)行測(cè)序,能夠精確記錄核糖體在翻譯過程中的位置。將轉(zhuǎn)錄組與Ribo-seq數(shù)據(jù)聯(lián)合分析,可以計(jì)算量化蛋白質(zhì)的合成速率。通過Ribo-seq分析,能夠鑒定新型的uORF、microPeptide、發(fā)現(xiàn)新穎的翻譯調(diào)控機(jī)制以及能夠被翻譯的lncRNA。

Ribo-seq已經(jīng)應(yīng)用于解析生長發(fā)育與分化、疾病發(fā)生機(jī)制和抗逆分子機(jī)制的研究。

應(yīng)用方向
Ribo-seq應(yīng)用于研究轉(zhuǎn)錄本的翻譯活性、鑒定翻譯起始位點(diǎn)、密碼子使用、ORF位置和mRNA的翻譯調(diào)控機(jī)制。

Ribo-seq技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用在動(dòng)物、植物和微生物的研究中,用于揭示生長發(fā)育、形態(tài)建成、疾病發(fā)生、逆境脅迫響應(yīng)的調(diào)控機(jī)制。總之,Ribo-seq能從基因組水平檢測(cè)正在翻譯的mRNA序列信息,揭示核糖體在mRNA上的位置和翻譯活性,并幫助解析翻譯調(diào)控機(jī)制。

藍(lán)景科信優(yōu)勢(shì)
  • 實(shí)驗(yàn)周期快、質(zhì)量高、結(jié)果穩(wěn)定可靠。
  • 豐富的物種經(jīng)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)流程
    分析內(nèi)容
標(biāo)準(zhǔn)生信分析
(1)原始數(shù)據(jù)過濾與測(cè)序質(zhì)量評(píng)估
(2)比對(duì)去除rRNA、tRNA、sRNA等
(3)Reads長度分布統(tǒng)計(jì)與長度過濾
(4)比對(duì)參考基因組
(5)測(cè)序飽和度分析
(6)ORF在基因組上的分布統(tǒng)計(jì)與分類
(7)三堿基節(jié)律分析
(8)翻譯基因統(tǒng)計(jì)與表達(dá)量分析
(9)樣本關(guān)系分析
(10)組間差異翻譯基因分析
(11)差異翻譯基因的GO和KEGG功能富集分析
(12)ORF的翻譯潛力分析
(13)ORF的特征分析
Ribo-seq與RNA-seq的聯(lián)合分析
(1)翻譯效率計(jì)算
(2)Ribo-seq與RNA-seq的相關(guān)性分析
(3)翻譯效率與轉(zhuǎn)錄水平的關(guān)聯(lián)分析 Clean reads長度統(tǒng)計(jì)             Reads在參考基因組不同區(qū)域的分布 P-Site分析 ORF分析  
ORF翻譯潛力分析   ORF特征鑒定
 uORF對(duì)annotated ORF的影響     Ribo-seq與轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)聯(lián)合分析

我們的優(yōu)勢(shì)

● 實(shí)驗(yàn)周期快、質(zhì)量高、結(jié)果穩(wěn)定可靠。

● 豐富的物種經(jīng)驗(yàn)。

已做物種
人,小鼠,豬,家蠶,果蠅,擬南芥,煙草,毛白楊,胡楊,甘薯,甲藻等

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