動物行為學之糖水偏好實驗(SPT)的詳細步驟及注意事項_abio生物試劑品牌網
糖水偏好實驗的詳細測試步驟、參數規格、注意事項和指標意義如下:
實驗前準備
a. 儀器選擇
實驗采用賽昂斯糖水偏好實驗系統自動記錄各種實驗數據;
產品特點:
1)單通道可同時記錄2路飲水狀態;
2)系統最多支持256通道;
3)重量精度0.01g,長期0點漂移小于±0.05g;
4)飲水次數可設置單次時間閾值0-10000ms,去除短暫的偽飲水數據;
5)雙傳感器檢測飲水事件,光電傳感器和重量傳感器,確保事件檢測的準確,保證計時的精度;
6)小鼠水瓶50ML、大鼠水瓶100ML,實驗專用水壺確保不漏水;
7)活動籠采用標準PSU飼養籠盒,減少動物應激反應,活動籠可高溫高壓滅菌,實驗中可放墊料;
8)數據記錄支持中途人工換水,只需在軟件上點擊一次交換水壺按鈕,即可進行交換水壺的操作,數據自動整合;
9)統計參數:總飲水次數、總飲水時間、總飲水次數、總飲水時間以及各指標直方圖、曲線圖等。
b. 動物適應期
在實驗開始前,動物(如小鼠或大鼠)通常需要單獨飼養3-7天,以消除社會因素對實驗結果的影響。在此期間,應確保動物處于恒溫、恒濕且有充足食物的環境中。
c. 糖水適應
實驗前1-2天,將糖水(通常為1%蔗糖溶液)提供給動物,讓它們適應糖水的味道(每隔6h交換兩個水瓶的位置)。
d. 糖水制備
實驗中使用的糖水通常為1%~2%的蔗糖溶液。為保證實驗結果的可靠性,實驗期間要保持糖水濃度的一致性。
實驗步驟
a. 在實驗當天,將糖水和普通水分別裝入兩個飲水瓶中,并清楚地標記。
b. 將糖水和普通水的飲水瓶同時放入動物籠內,使動物能夠自由選擇飲用。
c. 禁食禁水14h~23h,在籠上放置兩瓶水,其中一瓶為1%~2%蔗糖水,一瓶為飲用水。供大鼠1h內自由飲用兩瓶不同的水,30min 后,交換兩瓶的位置。采用賽昂斯糖水偏好實驗系統軟件自動記錄1h內大鼠對兩瓶的飲水量。在此后的糖水偏好測試時,均采用此方法,即禁水 14h~23h 后,進行糖水偏好測驗,測驗完成后,放回籠中飼養。
d. 實驗持續時間根據需求可設為1-2天或更長。
實驗細節
1、 飲水瓶裝置
1)提前準備好蔗糖。特意強調這個是因為如果不常做這個實驗,滿實驗室找不到蔗糖的情況也是有的。
2)準備與實驗動物相等的飼養小鼠的籠子,兩倍多的小水瓶、瓶塞。在使用前最好檢查水瓶和瓶塞是否完好,會不會漏水。如果水瓶和瓶塞坑坑洼洼就不要用了,不然大鼠喝水,大鼠腳下的墊料也一起幫著喝水,實驗數據就不準確。
3)稱重要精確。雖然實驗規范寫明,在飲水瓶里盛裝的液體體積,大鼠應不少于50ml。使用的單位是ml,但在實際過程中用量筒難以精準測量實際體積。如果大鼠沒有很愛喝某一瓶水,算上掛壁的損耗,做完實驗再次估讀變化的結果可能就是沒有變化。
4)做完實驗測定飲水量時,如果使用的是一個固定的容器,一定要記得把容器內的水擦干凈或者甩干凈。殘留的水看著不多,但其實很干擾實驗結果。省掉這一步,殘留的水多了,配合第三步不精準的估量,有機會得到動物喝完水還變多了的喜人結果。
2、 實驗動物
1)糖水偏好實驗必須單籠飼養時檢測,才能區分個體差異。如果有實驗動物在這之前是分組合籠飼養的,需要提前48-72h將動物單籠飼養,使動物能適應環境。貿然把新的大鼠放進去,你可能會欣喜的發現,結果層次不齊,該抑郁的動物沒有抑郁,不該抑郁的動物反而抑郁了。
2)水瓶位置定期更換是為了消除動物的單側偏愛。
3)蔗糖有熱量,在實驗前應該盡量保證動物的饑餓程度是一樣的。如果不一樣,饑餓的動物出于對熱量的偏愛可能會喝更多的糖水,影響實驗。(有的實驗造模給動物禁食過久,讓動物非常饑餓,動物會瘋狂喝糖水。)
4)動物對蔗糖的偏愛程度存在品系間差異和性別差異,有的動物對1%濃度的蔗糖敏感,有的動物不敏感,需要摸索條件。摸索條件時要重新訓練一次,否則可能還是做不出差異。
5)行為學檢測之前要想好時間,不能過于折騰老鼠。在糖水偏好實驗前動物體力消耗太多,在實驗時動物會傾向于睡覺而不是喝水。
指標意義
a. 糖水偏好指數(SPI)計算:SPI =(糖水攝入量 / 總攝入量)x 100%,其中總攝入量為糖水攝入量與普通水攝入量之和。SPI 可作為動物情緒狀況的一個初步指標。
b. 通常情況下,健康的動物會表現出較高的糖水偏好,而抑郁的動物可能會表現出較低的糖水偏好。因此,SPT 可以作為評估實驗動物抑郁癥狀的一個有效工具。然而,這種測試方法并非絕對可靠,僅能作為抑郁狀態的一個初步指標。
結合其他實驗方法:
為了更準確地評估動物的情緒狀態,通常需要結合其他行為學實驗(如強迫游泳試驗、尾懸掛試驗等)和生物學指標。通過對多種實驗結果進行綜合分析,研究者可以更全面地了解動物的情緒狀況以及抗抑郁藥物的療效。
應用領域
a. 研究實驗動物的抑郁癥狀及其與神經生物學和行為學的關系。
b. 評估抗抑郁藥物的療效。通過觀察藥物治療后動物糖水偏好是否恢復,可初步判斷藥物是否具有抗抑郁作用。
c. 探究環境因素、基因因素以及其他潛在因素對動物抑郁癥狀的影響。
總之,糖水偏好實驗是一種評估實驗動物情緒狀況的常用行為學實驗方法。通過對實驗過程的嚴格控制以及與其他實驗方法的結合,研究者可以更全面地了解動物的抑郁癥狀及其潛在機制。
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