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DSS誘導(dǎo)結(jié)腸炎造模教學(xué)及不同分子量的應(yīng)用異同點(diǎn)_abio生物試劑品牌網(wǎng)

abiopp5個(gè)月前 (08-05)技術(shù)137
DSS?結(jié)腸炎造模的經(jīng)典化合物!
然鵝,DSS 分子量多變:太小,誘導(dǎo)的炎癥較輕;太大,則難以穿透腸黏膜。
小小 DSS 誘導(dǎo)疾病造模也是大有門道兒,快來隨小 M 一起來看看吧~

Section.01
DSS 誘導(dǎo)結(jié)腸炎模型

DSS:

硫酸葡聚糖鈉鹽 (Dextran sulfate sodium salt),是一種水溶性的帶負(fù)電荷的硫酸化多糖,葡聚糖的聚陰離子衍生物 分子量高度可變,不同分子量的 DSS 具有不同的生物活性 ,常見的 DSS 分子量為 5,000-550,000 Da。

研究結(jié)腸炎的小伙伴們可能都知道,DSS 是經(jīng)典的結(jié)腸炎造模的化合物,可用于誘發(fā)急性/慢性結(jié)腸炎/結(jié)腸炎相關(guān)的結(jié)腸癌模型。Butttttt! DSS 分子量過小,誘導(dǎo)的炎癥較輕,分子量過大,則難以穿透腸黏膜。

目前最為常用的,是在飲用水中添加一定濃度的  DSS (分子量 36,000-50,000 Da) ,其誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎較為嚴(yán)重,且與人類潰瘍性結(jié)腸炎最為相似。

言而總之,總而言之,使用 DSS  (36,000-50,000 Da)  誘導(dǎo)結(jié)腸炎模型快速、簡(jiǎn)便、具有可重復(fù)和可控性,因而在炎癥性腸病  (BD)  研究中非常流行。此外,通過改變 DSS 的濃度和給藥周期及頻率,或與其他藥物聯(lián)用,可實(shí)現(xiàn)急性/慢性腸道炎癥、結(jié)腸炎相關(guān)的結(jié)腸癌模型的造模 [1]

小 M 為大家整理了使用 DSS  (36,000-50,000 Da)  誘導(dǎo)疾病模型的原理、方案和檢測(cè)驗(yàn)證指標(biāo),大家可自行參考喔~

DSS  (36,000-50,000 Da)  造模原理、方案和檢測(cè)
 

圖 1.  DSS (36,000-50,000 Da)   誘導(dǎo)不同結(jié)腸炎模型的實(shí)驗(yàn)周期[2][3][4][5][6[7]

Section.02
DSS 造模: 注意事項(xiàng)有哪些?

造模歸造模,熱乎勁上來了也要先看完這七大注意事項(xiàng)哇,寶子們!!!

造模小貼士
日常換水:建議每 1-2 天更換含 DSS 的飲用水,飲水量可以按照小鼠每天 7-10 mL,大鼠每天 11 mL/100 g 體重來計(jì)算,并檢查水瓶無堵塞、漏液發(fā)生。
做好記錄:每日記錄飲水量、確認(rèn)飲水量是否正常,記錄體重以及疾病表型,病理切片建議取肛門附近 1-2 cm 段。
預(yù)實(shí)驗(yàn):DSS 溶液的濃度、動(dòng)物的種類和品系可能都會(huì)影響造模效果,建議通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定造模最佳濃度。
誘發(fā)年齡:成功且易于重復(fù)地誘發(fā) DSS 結(jié)腸炎的最佳年齡范圍為 6-8 周,雄鼠可能比雌鼠更敏感。
動(dòng)物管理:為了減小飲水量差異,并更清楚地觀察造模進(jìn)展,建議每個(gè)籠子 2-3 只動(dòng)物,每籠不超過 5 只動(dòng)物。
DSS 分子量:有研究表明,36,000-50,000 Da 是建立結(jié)腸炎模型的最佳 DSS 分子量范圍。DSS 分子量過低,會(huì)導(dǎo)致炎性作用較弱,而分子量過大會(huì)導(dǎo)致吸收越困難[8][9]
AOM 劑量:根據(jù)實(shí)驗(yàn)室、小鼠設(shè)施和小鼠背景的不同,AOM 的影響可能有所不同。建議使用不同劑量的 AOM (7.5-12.5 mg/kg) 進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。AOM 導(dǎo)致的死亡通常在注射后 24 至 72 小時(shí)內(nèi)觀察到。


Section.03
MCE 實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證

實(shí)驗(yàn)方案
  • 實(shí)驗(yàn)組別:雄性 C57BL/6 小鼠 (7-8 周),n=5 (空白組) 或 7 (實(shí)驗(yàn)組)
  • 急性結(jié)腸炎模型:2% DSS (36,000-50,000 Da),飲水 7 天后取材;
  • 檢測(cè)指標(biāo):疾病表型,體重變化,結(jié)腸長(zhǎng)度,結(jié)腸 HE 染色。
 
實(shí)驗(yàn)結(jié)果


圖 2. DSS (2%, 飲用水,7 天) 誘導(dǎo)急性結(jié)腸炎模型。
A.7 天內(nèi)的體重變化,7 天后體重減輕約 20%。B. 疾病活躍指數(shù)評(píng)分。C. 7 天后取結(jié)腸,并測(cè)量結(jié)腸長(zhǎng)度,結(jié)果顯示結(jié)腸縮短。D. 結(jié)腸拍照。E. 遠(yuǎn)端結(jié)腸 HE 染色,結(jié)果顯示重度炎癥,炎癥浸潤(rùn)到黏膜下層并透壁,隱窩丟失大于 1/3,杯狀細(xì)胞丟失。

Section.04
其他分子量的 DSS

看到這里,想必大家都已經(jīng)記住了造結(jié)腸炎模型用的是  DSS(36,000-50,000 Da) ,那么其他分子量的 DSS 又有什么用途呢? (更多信息參考可登錄 MCE 官網(wǎng) 查詢~)

不同分子量 DSS 的常見應(yīng)用
 


 
不同分子量 DSS 的用途
比較



 

Section.05
小結(jié)

今天小 M 給大家提供了保姆式結(jié)腸炎造模教學(xué),還順便給大家整理了不同分子量的應(yīng)用異同點(diǎn)。如果覺得這篇干貨秘籍有幫助,別忘了收藏,點(diǎn)贊、分享哦~

產(chǎn)品推薦

Dextran sulfate sodium salt (MW 35,000-45,000) (HY-116282C)
結(jié)腸炎造模試劑

Dextran sulfate sodium salt (MW 5,000) (HY-116282)
抗凝劑,補(bǔ)體抑制劑。

Azoxymethane (AOM) (HY-111375)
結(jié)腸致癌物質(zhì),可與 DSS 聯(lián)用造結(jié)腸癌模型。




[1] ChassAIng B, et al. Dextran sulfate sodium (DSS)-induced colitis in mice. Curr Protoc Immunol. 2014 Feb 4;104:15.25.1-15.25.14.
[2] Kinchen J, et al. Structural Remodeling of the Human Colonic Mesenchyme in Inflammatory Bowel Disease. Cell. 2018 Oct 4;175(2):372-386.e17.
[3] Zhang H, et al. Biochanin a ameliorates DSS-induced ulcerative colitis by improving colonic barrier function and protects against the development of spontaneous colitis in the Muc2 deficient mice. Chem Biol Interact. 2024 May 25;395:111014.
[4] Dokoshi T, et al. Dermal injury drives a skin to gut axis that disrupts the intestinal microbiome and intestinal immune homeostasis in mice. Nat Commun. 2024 Apr 8;15(1):3009.
[5]. Wirtz S, et al. Chemically induced mouse models of intestinal inflammation. Nat Protoc. 2007;2(3):541-6.
[6]. Zhu H, et al. RNA virus receptor Rig-I monitors gut microbiota and inhibits colitis-associated colorectal cancer. J Exp Clin Cancer Res. 2017 Jan 5;36(1):2.
[7] Parang B, et al. AOM/DSS Model of Colitis-Associated Cancer. Methods Mol Biol. 2016;1422:297-307.
[8] Kitajima S, et al. Histological analysis of murine colitis induced by dextran sulfate sodium of different molecular weights. Exp Anim. 2000 Jan;49(1):9-15.
[9] Lu G, et al. Dextran Sulfate Protects Pancreatic β-Cells, Reduces Autoimmunity, and Ameliorates Type 1 Diabetes. Diabetes. 2020 Aug;69(8):1692-1707.
 


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