細胞凍存是保存細胞的重要手段，通過低溫來延緩細胞的生命活動。這種技術(shù)使細胞能夠得以保存，在需要的時候，又可以被復(fù)蘇用于各種實驗。

19世紀末，科學(xué)家開始研究低溫對生物組織的影響。早期的實驗表明，單純冷凍會導(dǎo)致細胞冰晶形成和滲透壓失衡而死亡。1937年，Luyet和Hodapp提出“冰晶損傷”理論，為后續(xù)冷凍保護研究奠定了基礎(chǔ)。1949年，英國科學(xué)家在研究精子冷凍時，偶然發(fā)現(xiàn)甘油能顯著提高冷凍后精子的存活率。甘油是一種滲透性冷凍保護劑（CPA），可進入細胞內(nèi)部，降低冰點并減少冰晶形成。它通過平衡細胞內(nèi)外的滲透壓，防止細胞在冷凍過程中因脫水而破裂。1959年，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)二甲基亞砜（DMSO）同樣具有優(yōu)異的冷凍保護效果，尤其適用于哺乳動物細胞。DMSO比甘油更易穿透細胞膜，且毒性較低，迅速成為細胞凍存的標準保護劑之一。1963年P(guān)eter Mazur提出冷凍損傷的“兩因素假說”：快速冷凍時，細胞內(nèi)冰晶形成，破壞細胞膜和細胞器；慢速冷凍時，細胞外冰晶形成導(dǎo)致細胞脫水，胞內(nèi)溶質(zhì)濃度升高，造成化學(xué)毒性。該理論為程序化慢凍法提供了科學(xué)依據(jù)。

實驗過程中，大多數(shù)細胞的凍存遵循“慢速凍存”的原則，通過程序降溫盒或程序化冷凍儀，控制降溫速率（通常為1°C/min），使細胞在冷凍過程中逐步脫水，避免細胞內(nèi)結(jié)冰。該方法顯著提高了凍存細胞的存活率。

研究表明5%-10%的DMSO最適合細胞凍存，具體比例要根據(jù)細胞種類調(diào)整，對DMSO敏感的細胞則需要降低比例。根據(jù)小尚的經(jīng)驗，8% DMSO適用于大部分細胞系。同時，還需根據(jù)細胞培養(yǎng)難度調(diào)整血清比例，越難養(yǎng)的細胞越要多加血清，過于脆弱的細胞可用血清+DMSO凍存，不加培養(yǎng)基。我們常用的凍存液配方是92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦)。

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尚恩生物提供的特級胎牛血清呈淺黃色澄清、無溶血溶液，經(jīng)各項檢測確認無菌、無支原體、無噬菌體及相關(guān)牛源病毒，低內(nèi)毒素（＜3EU/mL），不含外源激素、生長因子、抗生素等。細胞培養(yǎng)測試效果良好，細胞生長速度、形態(tài)均正常，可用于培養(yǎng)腫瘤細胞、原代細胞以及大部分干細胞。

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尚恩非程序性細胞凍存液（無血清）是一種不含血清且不需要經(jīng)過程序降溫步驟的凍存液，可以重懸細胞后直接置于超低溫冰箱而無需逐步降溫或者程序性凍存盒，極大方便了細胞凍存操作，同時減少了血清對細胞 及實驗的影響。

貨號：SNR-006

無論用何種凍存液，都建議做凍檢再正式凍存：即凍存24h后復(fù)蘇一支，確認細胞狀態(tài)沒問題，即可進行大批量凍存。凍檢成功前要留至少一瓶細胞培養(yǎng)，以免復(fù)蘇失敗導(dǎo)致細胞絕種。

公司簡介SUNNCELL

武漢尚恩生物技術(shù)有限公司坐落于武漢東湖高新區(qū)光谷生物城，專注于細胞及系列產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和服務(wù)，公司建有標準化GMP實驗室、動物房，已通過GB/T19001-2016/ISO9001:2015質(zhì)量管理體系認證，并獲得高新技術(shù)企業(yè)等多項榮譽。
 

公司主要研發(fā)生產(chǎn)細胞系、原代細胞、胎牛血清、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基、輔助試劑等系列產(chǎn)品，提供細胞及培養(yǎng)配套產(chǎn)品一站式采購服務(wù)；細胞庫儲存細胞系700余種，同時通過不間斷引種細胞擴大豐富細胞種類；公司還提供人源、小鼠源細胞系的STR鑒定，其他種屬細胞的種屬鑒定服務(wù)，細胞標志物檢測，污染檢測等細胞相關(guān)實驗服務(wù)。
 

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