陽離子交換填料在膠原蛋白純化中的應用_abio生物試劑品牌網
重組膠原蛋白的生產工藝概述 重組膠原蛋白是通過DNA重組技術制備的膠原蛋白。現已有多種表達系統應用于重組膠原蛋白的生產,包括大腸桿菌、酵母、哺乳動物細胞等表達系統,相較動物來源的膠原蛋白,具有產率高、成本低、周期短等優勢。重組膠原蛋白的生產工藝路線如下圖所示,包括發酵、澄清、層析純化、濃縮/換液、無菌過濾等步驟。
Fig.1 重組膠原蛋白的生產工藝
重組膠原蛋白對pH敏感,適合偏酸性的緩沖體系,因此常把陽離子交換層析用于可溶表達的重組膠原蛋白純化。博格隆的SP Bestarose FF和CM Bestarose FF層析介質具有高流速和高載量特點,適合銜接離心澄清后的樣品,快速獲得重組膠原蛋白純品。Diamond CD-S因其高分辨率特點,還可作為精細純化層析步驟,去除重組膠原蛋白相關的小分子和聚體形式,實現高純度重組膠原蛋白的生產。
應用案例
? 案例1: SP Bestarose FF層析純化重組XVII型膠原蛋白
樣品:與平衡溶液的電導和pH一致
Fig.2 SP Bestarose FF層析純化圖譜
該案例中,流穿中不含目的蛋白,繼續提高電導進行洗脫,獲得高純度膠原蛋白。? 案例2: CM Bestarose FF層析純化重組XVII型膠原蛋白
樣品:電導4.9 mS/cm,pH4.0
Fig.3 CM Bestarose FF層析純化圖譜
該案例中,經線性pH和電導優化,分別確定洗雜和洗脫條件,最終實現等度洗脫工藝,一步層析純度為91.16%。
? 案例3: Diamond CD-S層析去除III型重組膠原蛋白降解片段
樣品:Diamond Phenyl(HS)捕獲的III型重組膠原蛋白,調節電導和pH與平衡溶液一致。
Fig.4 Diamond CD-S層析純化圖譜
此案例中,Diamond Phenyl(HS)純化后的膠原蛋白仍存在少量降解形式,經Diamond CD-S層析,降解分子流穿,洗脫獲得大部分目標分子,且無明顯雜帶。
總結 合理的純化策略和高效的層析介質是確保膠原蛋白產品質量的關鍵。博格隆陽離子層析介質以其優異的分離純化效果和良好的批間一致性,可廣泛應用于膠原蛋白從實驗室到工業化生產的分離純化工藝中。
相關產品信息
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