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體外受精-胚胎移植一站解決！

一、小鼠體外受精-胚胎移植概念

體外受精（In Vitro Fertilization，IVF）是指將經體外獲得的成熟小鼠卵母細胞與已在體外完成獲能的精子混合，使其受精并形成受精卵（合子）的全過程。

不過，由于哺乳動物胚胎在體外條件下通常只能發育到囊胚等早期階段，若要獲得存活后代，必須將其通過胚胎移植（Embryo Transfer，ET）植入假孕母鼠子宮內完成妊娠。因此，在實驗動物學中，體外受精與胚胎移植常合稱為 IVF-ET 技術。

二、實驗前準備

1、材料與試劑

● 實驗動物：

供體鼠：SPF級超排卵雌鼠（3-5周齡，品系匹配）

精子來源：生育能力良好的雄鼠（通常8-16周齡），或凍存精子

受體鼠：SPF級假孕母鼠（與供體鼠同步發情）

● 核心試劑：

超數排卵激素：PMSG（孕馬血清促性腺激素）、hCG（人絨毛膜促性腺激素）

受精液、獲能液：小鼠精子獲能液TYH、小鼠體外受精液HTF

● 設備： 體視顯微鏡、CO?培養箱、超凈工作臺

2、環境要求

● SPF級操作間：超凈工作臺，定期消毒滅菌。

● 溫度控制：操作臺溫度恒定25℃，培養基預溫至37℃。

三、操作流程

①　3-5周齡雌鼠腹腔注射PMSG。

②　46-48小時后再注射hCG。

③　14-16小時后先取雄鼠的附睪尾，將精子收集至獲能皿培養1小時，激活精子。

④　然后摘取雌鼠的輸卵管，收集卵母細胞，移入受精滴。

⑤　接著將完成獲能的精子加入受精滴，進行體外受精。

⑥　4-6小時后，將受精的卵母細胞轉移至清洗滴中，清洗3遍，放回培養箱中過夜培養。

⑦　第2天挑選優質的2細胞胚胎，進行胚胎移植。

⑧　等待19天左右，乳鼠出生。

四、IVF-ET技術的應用價值

1、生物凈化和提高微生物等級

2、克服特殊品系繁殖障礙

3、高效利用寶貴的雄鼠資源

4、拯救珍貴品系和復蘇冷凍品系

5、快速獲得大量年齡高度一致的后代

6、縮短品系繁殖周期和降低實驗成本

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