豬輪狀病毒（Porcine Rotavirus，PRV）VP6 蛋白是輪狀病毒的核心結構蛋白，由病毒基因組第 6 節段（VP6 基因）編碼，在病毒粒子組裝、抗原性及宿主免疫應答中具有重要作用，是輪狀病毒研究和應用的關鍵靶標之一。

一、基本信息
蛋白名稱：豬輪狀病毒 VP6 蛋白（Porcine Rotavirus VP6 Protein）
基因來源：PRV 基因組的第 6 節段（雙鏈 RNA），高度保守且具有種屬特異性。
蛋白定位：位于輪狀病毒三層衣殼的中層（內衣殼），包裹病毒核心的 RNA 基因組，是病毒粒子結構的重要組成部分。
分子特征：
分子量約為 45-48 kDa。
序列保守性高，不同血清型的輪狀病毒 VP6 蛋白氨基酸序列同源性可達 70%-90%，這使其成為跨血清型檢測的理想靶標。

二、核心功能與特性
病毒結構維持
VP6 蛋白通過自身聚合形成二十面體對稱的內衣殼，為病毒核心提供結構支撐，并保護內部的 RNA 基因組免受外界環境破壞，是病毒粒子組裝的關鍵蛋白。
抗原性特征
具有較強的免疫原性，能誘導機體產生特異性抗體（以 IgA 為主，是黏膜免疫的重要靶標）。
因序列高度保守，其抗原表位可被不同血清型輪狀病毒共享，是開發廣譜診斷試劑和通用疫苗的重要靶點。
種屬特異性
VP6 蛋白的抗原性具有種屬區分性，可用于區分豬輪狀病毒與其他動物（如牛、羊）或人輪狀病毒，在流行病學調查中具有應用價值。

三、主要應用
診斷試劑開發
作為核心抗原用于 ELISA、膠體金試紙條、免疫熒光（IFA）等檢測方法，利用其保守性實現對豬輪狀病毒感染的快速、廣譜檢測，尤其適用于基層獸醫臨床或大規模篩查。
疫苗研發
由于 VP6 蛋白能誘導機體產生保護性黏膜免疫（如腸道 IgA 抗體），且保守性高，常被作為候選抗原開發亞單位疫苗或多表位疫苗，預防不同血清型豬輪狀病毒感染。
抗體制備
作為免疫原免疫小鼠、兔等實驗動物，制備抗 VP6 的單克隆抗體或多克隆抗體，用于病毒分型、蛋白定位（如免疫電鏡觀察病毒組裝過程）、病毒追蹤等研究。
基礎研究
用于探究輪狀病毒的復制機制（如內衣殼組裝與 RNA 包裝的關系）、VP6 與宿主細胞蛋白的相互作用，以及病毒對宿主免疫逃逸的機制等。

四、制備方法
VP6 蛋白可通過原核或真核表達系統制備，具體流程如下：
基因克?。簭?PRV 陽性樣本中擴增 VP6 基因，插入表達載體（如原核載體 pET 系列、真核載體 pcDNA 系列）。
蛋白表達：
原核表達（如大腸桿菌 BL21）：操作簡單、表達量高，適合大規模制備，但可能存在蛋白折疊錯誤，需優化復性條件。
真核表達（如昆蟲細胞、哺乳動物細胞）：可實現正確折疊和翻譯后修飾，活性更接近天然蛋白，但成本較高。
純化與鑒定：通過親和層析（如 His 標簽純化）獲得高純度蛋白，再經 SDS-PAGE 驗證分子量，Western blot 驗證抗原性，確保蛋白的正確性和活性。

五、研究意義
豬輪狀病毒是引起仔豬腹瀉的主要病原體之一，可導致仔豬脫水、死亡，給養豬業造成重大經濟損失。VP6 蛋白作為其保守且關鍵的抗原蛋白，不僅為病毒的快速診斷提供了可靠靶標，也為開發高效、廣譜的防控手段（如疫苗）奠定了基礎，對減少輪狀病毒感染的危害具有重要實踐價值。