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多重qPCR核心特點(diǎn)、優(yōu)勢及應(yīng)用領(lǐng)域的介紹_abio生物試劑品牌網(wǎng)

abiopp6個月前 (06-18)技術(shù)42

知識分享
告別“單打獨(dú)斗”，多重qPCR支持“團(tuán)隊作戰(zhàn)”
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什么是多重qPCR
多重qPCR是實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)的一種高級形式。它是在同一個PCR反應(yīng)體系中，同時使用多對引物和多個特異性的探針（或染料），針對兩個或兩個以上的不同目標(biāo)核酸序列（靶基因）進(jìn)行擴(kuò)增和實(shí)時定量檢測。簡單來說，就是“一管反應(yīng)，多個目標(biāo)”。

多重qPCR核心特點(diǎn)與優(yōu)勢

并行檢測：同時檢測多個靶標(biāo)。
節(jié)省樣本：對珍貴或有限的樣本（如臨床活檢、稀有細(xì)胞）特別有價值。
節(jié)省試劑與時間：比進(jìn)行多個單重qPCR反應(yīng)顯著減少試劑消耗和操作時間。
節(jié)省成本：降低了每個靶標(biāo)檢測的成本。
減少誤差：所有靶標(biāo)在完全相同的反應(yīng)條件下進(jìn)行擴(kuò)增，減少了管間差異帶來的誤差，結(jié)果可比性更高。
提高通量：非常適合高通量篩查和需要同時檢測多個指標(biāo)的應(yīng)用（如病原體分型、多基因表達(dá)分析、SNP分型等）。
內(nèi)參共檢：可以輕松地將內(nèi)參基因與目標(biāo)基因放在同一個反應(yīng)中進(jìn)行檢測，提高定量的準(zhǔn)確性。

多重qPCR主要應(yīng)用領(lǐng)域

病原體檢測與分型（如同時檢測多種病毒、細(xì)菌或耐藥基因）
基因表達(dá)分析（同時檢測多個功能相關(guān)基因或通路基因）
基因分型（如SNP、插入/缺失檢測）
轉(zhuǎn)基因檢測（同時檢測多個轉(zhuǎn)基因元件或品系特異性標(biāo)記）
拷貝數(shù)變異分析
食品安全檢測（同時檢測多種過敏原或污染物）

多重qPCR主要類型
多重qPCR主要根據(jù)所使用的化學(xué)發(fā)光方法來分類，主要包括：

水解探針法：最常用，高特異高靈敏，多重能力取決于通道數(shù)。
染料法：成本最低，但特異性低，多重能力有限（依賴Tm差異）。
分子信標(biāo)法：背景低，對點(diǎn)突變鑒別強(qiáng)，設(shè)計復(fù)雜。
ScorPIons法：速度快靈敏度高，設(shè)計最復(fù)雜成本最高。

在實(shí)際應(yīng)用中，基于水解探針的多重qPCR因其良好的平衡性（特異性、靈敏度、多重能力、相對成熟度）而成為絕對的主流。染料法主要用于靶標(biāo)少且Tm差異明顯、對成本敏感的非關(guān)鍵應(yīng)用。分子信標(biāo)和Scorpions則在特定需求場景下使用。

QX系列實(shí)時熒光定量PCR系統(tǒng)
杰萊美QX系列實(shí)時熒光定量PCR系統(tǒng)最大可實(shí)現(xiàn)單管6重?zé)晒鈾z測，6通道96孔檢測時間不超過5秒，實(shí)現(xiàn)對珍貴樣本最大限度的利用和數(shù)據(jù)挖掘。另外搭配業(yè)界領(lǐng)先的熒光定量PCR數(shù)據(jù)處理軟件，QX系列將熒光信號處理、專業(yè)的數(shù)據(jù)計算方法、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)慕y(tǒng)計學(xué)分析功能整合為一站式解決方案，從核酸到蛋白研究，滿足探索各種科學(xué)問題的實(shí)驗需要，重新定義了科研級熒光定量PCR系統(tǒng)。

基于杰萊美QX系列實(shí)時熒光定量PCR系統(tǒng)，設(shè)計了六重qPCR實(shí)驗，首先通過執(zhí)行DNA系列稀釋（最低濃度為100cp/uL），對6個靶標(biāo)基因進(jìn)行梯度檢測，繪制出如下的標(biāo)準(zhǔn)曲線。如圖所示，每個靶標(biāo)的反應(yīng)都顯示出極好的擴(kuò)增效率，E值在接近100%的范圍內(nèi)，且R2值均大于0.99，接近1。這些結(jié)果證明了QX系列實(shí)時熒光定量PCR系統(tǒng)具有卓越的檢測性能，支持6靶標(biāo)的精準(zhǔn)檢測，可為您的實(shí)驗提供最大限度的靈活性。