智能熱板儀，熱板測痛儀（熱板法）

【目的】

1.掌握鎮(zhèn)痛藥的實(shí)驗(yàn)法。

2.觀察羅通定的鎮(zhèn)痛作用。

【原理】

熱板法是鎮(zhèn)痛藥物篩選中常用的一種方法,也是一種能確定區(qū)分中樞神經(jīng)末梢神經(jīng)鎮(zhèn)痛機(jī)理的方法,有較廣的使用范圍,熱板法對動物組織損傷最小,動物可反復(fù)使用,痛反應(yīng)潛伏期較長,便于觀察及測出藥物之間的較小差異,比較出藥物作用的強(qiáng)弱快慢及持續(xù)時(shí)間。

將小鼠置于一定溫度的熱板上，熱刺激小鼠足部產(chǎn)生痛反應(yīng)，即舔足反應(yīng)。以小鼠出現(xiàn)舔足的時(shí)間作用為痛反應(yīng)指標(biāo)，判斷藥物是否具有鎮(zhèn)痛作用。

【器材】 熱板儀、天平、注射器等。

【動物】 小鼠

【藥品】 0.2%羅通定、生理鹽水（NS）

【方法一】

1.預(yù)選動物：預(yù)選30s內(nèi)有痛反應(yīng)的小鼠。將小鼠置于熱板儀內(nèi)，溫度55±0.5℃，測定小鼠的痛閾值，測2次，每隔5min測量1次，以小鼠舔后足作為觀察指標(biāo)。

2.分組及給藥：取預(yù)選合格的小鼠4只，隨機(jī)分為二組，2只/組，一組：ip生理鹽水0.2ml/10g體重；二組：0.2%羅通定 0.2ml/10g體重。

3.給藥后20、40min測定痛閾值，若小鼠60s內(nèi)無痛反應(yīng)，立即取出，按60s計(jì)算。

 

1、實(shí)驗(yàn)前預(yù)篩選：以小鼠為例，取若干只小鼠，實(shí)驗(yàn)前24h腹部去毛，將小鼠逐只置于(55.0±0.5)℃熱板儀上，測定記錄小鼠的痛閾值，以舔后足為痛覺指標(biāo)，挑選痛閾值為5~30ｓ的小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

2、 給藥前痛閾值的測定：將篩選出的小鼠逐只置于熱板儀上，各測２次痛閾（間隔10min），取平均值作為小鼠基礎(chǔ)痛閾即給藥前的正常痛閾值。

3、 給藥后痛閾值的測定：在服用鎮(zhèn)痛或麻醉藥物后，測量小鼠在熱盤上舔爪的平均時(shí)間，該時(shí)間對應(yīng)的是小鼠服用藥物后對熱刺激的反應(yīng)，作為給藥后痛閾值。若小鼠在熱板儀上60s內(nèi)仍無痛覺反應(yīng)，立即取出按60s計(jì)算并統(tǒng)計(jì)給藥前后的痛閾值。

4、痛閾提高的百分率：對兩組時(shí)間值的比較，評估鎮(zhèn)痛或麻醉藥物的效果。

計(jì)算方式：痛閾提高的百分率＝［（給藥后的痛閾－基礎(chǔ)痛閾）／基礎(chǔ)痛閾］×100％。

【注意 】

1、用小鼠，痛閾反應(yīng)時(shí)間超過60s應(yīng)立即取出以免燙傷足部。

2、室溫以15℃左右為宜，過低反應(yīng)遲鈍，過高則敏感。

3、鎮(zhèn)痛百分率大于50%時(shí)，才能認(rèn)為有鎮(zhèn)痛效力。