β 細胞素（betacellulin）
重組人 β- 細胞素是通過大腸桿菌表達的重組人 betacellulin ，制備出來的蛋白在 n 端比 betacellulin 序列多了一個甲硫氨酸。β 細胞素（betacellulin，簡稱 BTC）是表皮細胞生長因子家族的一員，在很多器官系統的正常發育過程中起著關鍵作用，尤其是在胰腺組織中大量表達，這表明 β 細胞素可能在胰腺發育以及胰腺干細胞分化方面有著重要作用。?

β 細胞素蛋白
β 細胞素蛋白（betacellulin，也叫 btc 蛋白）是一種由轉基因小鼠的胰腺 β 腫瘤細胞產生的多肽因子 ，通過對 cdna 的分析，它的全長氨基酸序列已經研究得很清楚了。最開始，btc 蛋白被發現能促進小鼠 3t3 細胞生長，后來又發現它對血管平滑肌細胞和視網膜色素上皮細胞的生長也有促進作用。?

在正常生理情況下，人體內的 btc 蛋白數量極少，而且受各種因素限制，從組織里提取非常困難。近些年來，借助基因工程技術，已經能夠成功生產出數量較多、價格相對便宜的人 btc 蛋白。有報道顯示，btc 蛋白可用于治療創傷、腫瘤、血管畸形等疾病，還能制成抗體或假性肽競爭劑，用來治療動脈粥樣硬化、糖尿病視網膜病變等因平滑肌生長引發的疾病。?

在現有的技術里，制備 btc 蛋白大多采用基因工程方法，主要通過大腸桿菌和哺乳動物細胞來表達。以往有報道稱，用哺乳動物細胞表達 betacellulin 時，會使用含血清的培養基。但血清批次間差異大，成分不一致，導致重組蛋白穩定性差，而且血清可能讓表達的重組蛋白存在病毒風險，不利于后續的工業化生產。用大腸桿菌表達時，會引入外源融合標簽，并且制備過程中不對標簽進行切割去除，外源標簽的存在會嚴重影響 betacellulin 的結構和功能，致使重組 betacellulin 失去活性，或者產生非預期的功能。?

案例分享
原發性肝癌（Hepatocellular carcinoma，簡稱 HCC）是我國常見的消化系統惡性腫瘤，它發展速度快，預后效果差。肝癌很容易在早期就發生轉移，這是導致肝癌預后不好的重要原因，所以研究肝癌的轉移機制一直是肝癌研究的熱點。β 細胞素（betacellulin，簡稱 BTC）是表皮細胞生長因子（ePIdermal growth factor，簡稱 EGF）家族的成員之一 。近年來的研究表明，BTC 可能參與了腫瘤生長發展的生物學過程。?

研究的目的是探究 BTC 在肝癌細胞和組織中的表達異常情況，以及它對肝癌的作用和機制。具體要檢測 BTC 在肝癌細胞與正常肝細胞、肝癌組織與癌旁組織中的表達差異，明確 BTC 對肝癌侵襲性的作用，并研究其調控機制。?

研究方法如下：?
用 RT-PCR 和 Western blot 技術，檢測 4 種肝癌細胞系（Huh7、HepG2、SMCC - 7721、MHCC97 - H）以及正常肝細胞系（HL - 7702）中 BTC 的表達情況。?

采用免疫組化染色的方法，對比肝癌組織和癌旁組織中 BTC 的表達，分析其對肝癌病理特征的影響。?

對 SMCC - 7721、MHCC97 - H 細胞，一方面用 siRNA 降低 BTC 的表達，另一方面在細胞培養液中加入重組人 BTC 。分別通過 MTT 法以及 Transwell 遷移、侵襲實驗，研究 BTC 對肝癌細胞增殖、遷移、侵襲的影響，并分析其中的機制。?

研究結果如下：?
BTC 在肝癌細胞系（Huh7、HepG2、SMMC - 7721、MHCC97H）中的表達量，明顯高于正常肝細胞系（HL - 7702），而且隨著肝癌細胞系侵襲能力變強，BTC 表達量也增高，差異具有統計學意義（P<0.05）。?

BTC 在肝癌組織及其附近呈現高表達，當腫瘤直徑≥3 厘米，癌組織浸潤包膜時，BTC 表達也存在差異，具有統計學顯著性（P<0.05）。?

通過 siRNA 降低 BTC 表達后，SMCC - 7721 和 MHCC97 - H 細胞的增殖、遷移、侵襲能力下降；在培養液中加入 BTC 后，SMCC - 7721 和 MHCC97 - H 細胞的增殖、遷移、侵襲能力增強。并且明確了 BTC 可能通過 PI3K/AKT 信號通路影響 XIAP 表達，來實現上述調控。?

結論
BTC 在肝癌細胞和肝癌組織中的表達量，分別高于正常肝細胞和癌旁組織，與肝癌的病理特征相關，并且可能通過激活 PI3K/AKT 信號通路上調 XIAP 表達，增強肝癌細胞的增殖、遷移、侵襲能力。