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LTXFECT線性PEI 40000高效低毒科研轉染試劑說明書_abio生物試劑品牌網

abiopp7個月前 (05-12)技術49
基因功能研究、重組蛋白生產和細胞治療領域,轉染效率與細胞活性始終是科研人員面臨的"雙刃劍"難題。中喬新舟自主研發的LTXFECT線性 PEI 40000,憑借其創新的分子設計與卓越性能,正為全球生命科學研究提供更優解決方案。
 
如下是線性PEI 40000化學結構式:

 
核心優勢
 

√ 超80%平均轉染效率(HEK293/CHO等常見細胞系驗證)
√ 低細胞毒性保障實驗穩定性
√ 任選包裝形式:粉末速溶配方-即配即用和即用型液體包裝
√ 兼容多種細胞系(含HEK293T/Sf9/HepG2等)
√ 無丙酰基殘留干擾

為何選擇中喬新舟LTXFECT線性PEI 40000?
 

相較于傳統分枝化結構,LTXFECT線性PEI 40000采用獨特線性聚合技術
? 高密度陽離子:通過精準控制40000分子量,形成強效核酸結合位點
? 智能復合物:帶負電核酸與陽離子聚合物自組裝,穿透效率提升30%
? 生物相容性優化:線性結構減少細胞膜損傷,存活率提升至95%+
 
【突破性技術對比】
 

與常規PEI相比,LTXFECT線性PEI 40000實現三大革新:
1.溶解革新:直接水溶 vs 弱酸預處理+pH回調(節省15分鐘操作時間)
2.純度升級:完全脫落結構 vs 4-11%丙酰基殘留(避免DNA結合位點屏蔽)
3.效能飛躍:轉染效率提升20%+(經CHO-K1細胞系等平行實驗驗證)
 
多場景應用驗證
 

? 懸浮/貼壁細胞通用:HEK293系列穩轉株構建周期縮短至72小時
? 難轉染細胞突破:Hela細胞轉染成功率突破85%臨界值
? 昆蟲細胞適配:Sf9細胞蛋白表達量提升2.1倍(對比脂質體法)
 
【專家級操作指南
 

三步完成轉染:
1.配制:1mg/ml水溶液,渦旋10秒即完全溶解
2.復合:DNA: LTXFECT線性 PEI 40000=1:3(推薦初始比例)
3.轉染:6孔板體系僅需5分鐘孵育時間
 
【操作步驟】
 

試劑準備:

1g粉劑定容在1L純水中,需用NaOH/HCL調節PH到6.90-7.10,一次性無菌濾器過濾,4℃備用。

瞬時轉染方法:

一. 接種細胞, 轉染前一天,用膠原酶消化細胞并計數(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到 70~80%。 

二. 準備DNA-PEI 40000復合物,DNA、PEI 40000試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。用中喬新舟轉染專用減血清培養基(貨號:ZQ-300-ST)稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI 40000試劑。每1μg DNA 需用2-5μL線性PEI 40000轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI 40000轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25 min以形成DNA-PEI 40000復合物。 

三. 轉染細胞,直接向每個孔中加入DNA-PEI 40000復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時,去除生長培養基,替換成無血清培養基,然后滴DNA-PEI 40000復合物。轉染3 h后,添加1/2體積的包含30%血清的生長培養基。 

四.孵育細胞和分析結果,在CO2培養箱中 37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后最快7 h即可檢測到轉入基因的表達。請自行確定最適合檢測時間。
 
穩定轉染方法:

一.接種細胞,轉染前一天,用胰酶消化細胞并計數。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。 

二.準備DNA-PEI 40000復合物:DNA、PEI 40000試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。用中喬新舟轉染專用減血清培養基(貨號:ZQ-300-ST)稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μg DNA 需用2-5μL線性PEI 40000轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI 40000轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25 min以形成DNA-PEI 40000復合物。

三.轉染細胞,直接向每個孔中加入DNA-PEI 40000復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時,去除生長培養基,替換成無血清培養基,然后滴DNA-PEI 40000復合物。轉染3 h后,添加1/2體積的包含30%血清的生長培養基。 

四.孵育細胞和分析結果:在CO2培養箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后最快7h即可檢測到轉入基因的表達。

五.轉染24 h后,將細胞傳代至新鮮的生長培養基中(將細胞稀釋10倍以上),在CO2培養箱中37℃孵育過夜。第二天加入與轉染抗性基因相匹配的篩選藥物。約1~2周可篩選到耐藥性克隆,在這期間需經常更換含篩選藥物的生長培養基。

以下是293T細胞轉染前后的細胞對比圖:

 
產品列表:

 


中喬新舟為每批次PEI 40000提供:
ISO9001質量認證
細胞轉染效率驗證報告
專屬技術顧問支持
讓LTXFECT線性 PEI 40000成為您實驗室的"轉染加速器"!

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