Exercise mitigates flow recirculation and activates metabolic transducer SCD1 to catalyze vascular protective metabolites

KS：Exercise；flow recirculation；SCD1

作為對(duì)周期性心臟收縮的響應(yīng)，血流在動(dòng)脈循環(huán)中是脈動(dòng)性的，脈動(dòng)剪切應(yīng)力（PSS）是單向的，并且與血流方向?qū)R。PSS 促進(jìn)血管保護(hù)性介質(zhì)，包括內(nèi)皮一氧化氮合酶（eNOS）和超氧化物歧化酶（SOD），以減弱促炎細(xì)胞因子、粘附分子和還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶系統(tǒng)。相比之下，擾動(dòng)的血流，包括振蕩剪切應(yīng)力 （OSS），在主動(dòng)脈弓和動(dòng)脈分叉處發(fā)展。OSS 是雙向的，并且與血流方向錯(cuò)位，激活 NADPH 氧化酶以促進(jìn)活性氧（ROS）。OSS 還誘導(dǎo)核因子κB（NF-κB）增加炎性細(xì)胞因子和血管細(xì)胞粘附分子1（VCAM1）。

體育鍛煉可增加循環(huán)系統(tǒng)中的血流，并調(diào)節(jié)分子轉(zhuǎn)導(dǎo)以改善代謝紊亂。在運(yùn)動(dòng)過(guò)程中，心肌收縮力和心率（HR）的增加會(huì)促進(jìn) PSS 改善內(nèi)皮可塑性，減輕動(dòng)脈粥樣硬化形成，并延緩認(rèn)知衰老和神經(jīng)退化。然而，特定運(yùn)動(dòng)激活的代謝傳感器在易紊亂血管系統(tǒng)中減輕氧化和炎癥的研究仍在進(jìn)行中。

硬脂酰輔酶A去飽和酶1（SCD1）是位于線粒體相關(guān)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（ER）膜（MAMs）中的關(guān)鍵酶，它催化飽和脂肪酸（SFAs）轉(zhuǎn)化為 omega 9-單不飽和脂肪酸（MUFAs）。SCD1 的主要代謝物是油酸（OA）和棕櫚油酸（PA），它們分別由硬脂酸和棕櫚酸去飽和形成。據(jù)報(bào)道，雖然層流（穩(wěn)態(tài)和非脈動(dòng)流）上調(diào)培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中 PPARγ 依賴性 SCD1 表達(dá)，但最近，美國(guó)加州大學(xué)洛杉磯分校大衛(wèi)格芬醫(yī)學(xué)院心臟病學(xué)系、生物工程系研究團(tuán)隊(duì)試圖證明自主轉(zhuǎn)輪跑步運(yùn)動(dòng)增強(qiáng)的 PSS 可減輕主動(dòng)脈弓較小曲率中的血流再循環(huán)，并激活內(nèi)皮 SCD1 以催化保護(hù)性代謝物。

為此，該團(tuán)隊(duì)在動(dòng)脈粥樣硬化小鼠模型（Ldlr-/-Scd1EC-/-）中使內(nèi)皮特異性缺失 SCD1 ，并接受高脂飲食（HFD）和自主輪式運(yùn)動(dòng)，對(duì)主動(dòng)脈弓較小曲率的血流再循環(huán)進(jìn)行了計(jì)算機(jī)模擬，并分析了 SCD1 介導(dǎo)的基因簇和抗炎代謝物的轉(zhuǎn)錄組學(xué)譜。研究表明，運(yùn)動(dòng)會(huì)增加時(shí)間-平均剪切應(yīng)力（τave）并降低較小曲率處的振蕩剪切指數(shù)（OSIave），且 PSS 激活 SCD1 作為代謝組學(xué)傳感器，以催化血管保護(hù)代謝物進(jìn)行抗炎反應(yīng)。研究成果發(fā)表在Science Advances期刊題為“Exercise mitigates flow recirculation and activates metabolic transducer SCD1 to catalyze vascular protective metabolites”。
將人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞（HAECs）暴露于動(dòng)態(tài)流動(dòng)系統(tǒng)中，非靶向代謝組學(xué)分析表明，PSS（50 dyne cm2，1 Hz）使 SCD1 催化的代謝物 OA 增加 2 倍，OSS（0.1 ± 4 dyne cm2，1 Hz）使其增加 1.3 倍。代謝物熱圖和主成分分析（PCA）均顯示 PSS 和 OSS 介導(dǎo)的代謝物與基礎(chǔ)水平分離。如前所述，PSS 進(jìn)一步增加了糖酵解代謝物的產(chǎn)生。這些結(jié)果表明，PSS 激活內(nèi)皮 SCD1 以催化脂質(zhì)代謝物，這促使研究人員探索 PSS 是否會(huì)增加接受自主轉(zhuǎn)輪運(yùn)動(dòng)的小鼠的內(nèi)皮 SCD1 和隨后的血管保護(hù)。

CFD 模型顯示，在主動(dòng)脈弓較小曲率處具有較低的時(shí)間-平均壁剪切應(yīng)力（TAWSS）和流動(dòng)再循環(huán)。為了計(jì)算運(yùn)動(dòng)介導(dǎo)的 PSS 與 OSS，納入了 HR 和血流的變化。計(jì)算機(jī)分析表明，運(yùn)動(dòng)增強(qiáng)的 PSS 在較小曲率和較大曲率中均增加了 TAWSS，并在較小曲率中減輕了流動(dòng)再循環(huán)，而 OSIave 略有減少。這支持運(yùn)動(dòng)可調(diào)節(jié) TAWSS 和 OSIave，以減輕易血流紊亂的主動(dòng)脈弓小曲率中的血流再循環(huán)。

為了證明運(yùn)動(dòng)介導(dǎo)的代謝物，在自主輪式跑步 24 小時(shí)之前和之后立即對(duì)雄性野生型 C57BL/6J 小鼠進(jìn)行了非靶向代謝組學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)運(yùn)動(dòng)后血漿 OA 顯著增加，PA 有增加趨勢(shì)。PCA 顯示，運(yùn)動(dòng)前后脂質(zhì)代謝物有明顯的分離。2 周后，主動(dòng)脈內(nèi)皮的面部免疫染色顯示，SCD1 在主動(dòng)脈弓的小曲率和降主動(dòng)脈中的表達(dá)增加（圖1 B、C）。SCD1 染色在亞細(xì)胞核周區(qū)突出，但在 SCD1內(nèi)皮特異性缺失小鼠（Scd1EC-/-）中不存在。與 Scd1 特異性探針的原位雜交（RNAscope）證實(shí)了，運(yùn)動(dòng)后野生型小鼠主動(dòng)脈弓和降主動(dòng)脈中內(nèi)皮 SCD1 表達(dá)增加（圖1 E）。這些數(shù)據(jù)表明，運(yùn)動(dòng)增強(qiáng)的 PSS 與激活內(nèi)皮 SCD1 表達(dá)有關(guān)。

圖1 運(yùn)動(dòng)會(huì)激活內(nèi)皮 SCD1。

接下來(lái)，為了證明 SCD1 介導(dǎo)的代謝物對(duì)血管內(nèi)皮保護(hù)的作用，評(píng)估了致動(dòng)脈粥樣硬化炎癥標(biāo)志物。OA 處理降低了脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的 HAECs 中 Vcam1、Icam1、Mcp1、Esel（E-選擇素）和 Cxcl8 趨化因子 mRNA 的表達(dá) （圖2 A）。OA 還降低了 ER 應(yīng)激相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子，即 Atf3、Atf4 和 Atf6 mRNA 表達(dá)。

然后，通過(guò)基于腺病毒的重組系統(tǒng)過(guò)表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞 SCD1，以證明 Cxcl8 及其受體 Cxcr1 和嗅覺(jué)受體2（Or6a2）mRNA 表達(dá)的降低（圖2 B）。脂質(zhì)組學(xué)分析顯示，SCD1 過(guò)表達(dá)后，細(xì)胞內(nèi)組分和條件培養(yǎng)基中的 OA 濃度均增加（圖2 C）。PCA 分析顯示，與對(duì)照細(xì)胞相比，SCD1 過(guò)表達(dá)改變了脂質(zhì)組學(xué)特征，并增加了甘油三酯中的 MUFA 含量。過(guò)表達(dá) SCD1 的 HAEC 條件培養(yǎng)基減輕了 LPS 誘導(dǎo)的 HAECs 中炎癥基因表達(dá)（圖2 D），表明細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外 OA 都賦予抗炎反應(yīng)。

圖2 OA 處理或 SCD1 過(guò)表達(dá)減輕 HAEC 中的促炎介質(zhì)。

為了進(jìn)一步證明 SCD1 介導(dǎo)的血管保護(hù)，構(gòu)建動(dòng)脈粥樣硬化（Ldlr-/-）內(nèi)皮特異性缺失 SCD1小鼠模型（Ldlr-/- Scd1EC-/-），并喂食 HFD，14 天后，HFD 小鼠進(jìn)行自主轉(zhuǎn)輪跑步（HFD-EX）。

第 28 天，靶向定量代謝組學(xué)分析顯示，與SCD1 沒(méi)有缺失的 Ldlr-/-Scd1 EC-/- 小鼠相比，久坐的 Ldlr-/-Scd1EC-/- 小鼠的循環(huán) OA 和 PA 基礎(chǔ)水平降低。運(yùn)動(dòng)組的 Ldlr-/-Scd1EC-/- 小鼠的血漿 OA 和 PA 水平與久坐組相似，而運(yùn)動(dòng)組的 Ldlr-/- 小鼠的 OA 和 PA 顯著升高。這些發(fā)現(xiàn)支持運(yùn)動(dòng)促進(jìn)小鼠 SCD1 催化的血漿 OA 和 PA 水平的觀點(diǎn)。

計(jì)算機(jī)模擬顯示，運(yùn)動(dòng)增強(qiáng)的 PSS 減輕了沿主動(dòng)脈弓較小曲率的血流再循環(huán)（圖3 A）。接下來(lái)，通過(guò)共聚焦顯微鏡對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞 ETS-相關(guān)基因（ERG）核標(biāo)記物和VCAM1粘附分子進(jìn)行表面免疫染色。HFD 喂養(yǎng)的 Ldlr-/-小鼠受干擾血流暴露的小曲率中VCAM1 表達(dá)突出。HFD 喂養(yǎng)的 Ldlr-/-Scd1EC-/- 小鼠的 SCD1 缺失也產(chǎn)生了相似的 VCAM1 染色表達(dá)。然而，自主輪式運(yùn)行 14 天減輕了 Ldlr -/- 小鼠中 VCAM1 的表達(dá)，但在 Ldlr -/- Scd1EC-/- 小鼠中沒(méi)有降低（圖3 A、C）。

在內(nèi)皮暴露于 PSS 的降主動(dòng)脈中（圖3 B）未觀察到 VCAM1 表達(dá)。共聚焦成像證實(shí)了 HFD 喂養(yǎng)的 Ldlr -/- 小鼠降主動(dòng)脈中少量的 VCAM1 陽(yáng)性細(xì)胞，而內(nèi)皮 Scd1 （Ldlr -/- Scd1EC-/-）的缺失增加了 VCAM1 陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量。此外，14 天的自主運(yùn)動(dòng)并未減少 Ldlr-/- Scd1EC-/- 小鼠中 VCAM1 陽(yáng)性內(nèi)皮細(xì)胞（圖3 B、C）。

運(yùn)動(dòng)后，Ldlr-/- 小鼠在主動(dòng)脈弓的受干擾血流區(qū)域產(chǎn)生了明顯的 SCD1 染色，這在 Ldlr-/-Scd1EC-/- 小鼠中不存在，與 SCD1 特異性探針（RNAscope）的原位雜交證明了這一點(diǎn)（圖3 E）。因此，運(yùn)動(dòng)增強(qiáng)的 PSS 激活內(nèi)皮 SCD1 以減少粘附分子的表達(dá)。

圖3 內(nèi)皮特異性 Scd1 缺失消除了運(yùn)動(dòng)介導(dǎo)的抗炎介質(zhì)。

最后，對(duì)經(jīng)歷三種情況的 Ldlr-/- 小鼠的主動(dòng)脈進(jìn)行了單細(xì)胞 RNA 測(cè)序：（i）正常食物飲食，（ii）HFD 和（iii）HFD-EX，確定了一個(gè)明確的內(nèi)皮亞簇，其中較高水平的 Pparγ 和 Scd1 與較高水平的 Vcam1 表達(dá)相關(guān)。大多數(shù) Vcam1 表達(dá)較高的內(nèi)皮細(xì)胞與 HFD 相關(guān)。通過(guò)將內(nèi)皮轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)與已發(fā)布的數(shù)據(jù)庫(kù)整合，發(fā)現(xiàn)與內(nèi)皮 Scd1 相互作用的潛在候選基因，包括脂聯(lián)素受體2（Adipor2）、過(guò)氧化物酶體酰基輔酶 A 氧化酶 1（Acox1）和胰島素受體底物2（Irs2）。

圖4 主動(dòng)脈中運(yùn)動(dòng)增強(qiáng)的 PSS 和動(dòng)脈粥樣硬化保護(hù)代謝物的血流響應(yīng)性 PPARγ-SCD1 通路的激活示意圖模型。

運(yùn)動(dòng)減輕主動(dòng)脈弓中的血流再循環(huán)和 OSI。位于 ER 膜中的 SCD1 催化 SFA 轉(zhuǎn)化為 MUFA，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)和循環(huán)中 OA 的水平增加。OA 抑制 NF-κB 介導(dǎo)的內(nèi)皮炎癥標(biāo)志物。

總之，該研究表明，運(yùn)動(dòng)增強(qiáng)的 PSS 激活內(nèi)皮 SCD1 以催化血管保護(hù)性脂質(zhì)代謝物 OA 和 PA。雖然 SCD1 與跨組織代謝相關(guān)，但研究揭示了內(nèi)皮特異性 SCD1 可減輕受干擾血流暴露的主動(dòng)脈弓中的炎癥反應(yīng)。總體而言，遺傳小鼠模型的整合、自主運(yùn)動(dòng)和計(jì)算機(jī)分析提供了對(duì)血流響應(yīng) SCD1 作為代謝轉(zhuǎn)導(dǎo)以減輕心臟代謝紊亂的見(jiàn)解。

參考文獻(xiàn)：Cavallero S, Roustaei M, Satta S, Cho JM, Phan H, Baek KI, Blázquez-Medela AM, Gonzalez-Ramos S, Vu K, Park SK, Yokota T, Sumner J, Mack JJ, Sigmund CD, Reddy ST, Li R, HsiAI TK. Exercise mitigates flow recirculation and activates metabolic transducer SCD1 to catalyze vascular protective metabolites. Sci Adv. 2024 Feb 16;10(7):eadj7481. doi: 10.1126/sciadv.adj7481. Epub 2024 Feb 14. PMID: 38354249; PMCID: PMC10866565.

原文鏈接：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38354249/

IF：11.7

ISSN:2375-2548

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